提高SARS-CoV-2抗体检测的生物发光

科学就是要弄清楚是如何工作的,然后使用该知识,进一步我们的理解或者创建一个可以解决世界面临的问题的工具的做法。生物发光工具和分析是做所有这些事情科学的例子。生物发光是光得到(发光)的化学物质,所使用的许多生命形式反应。当萤火虫在暮色中闪烁,他们使用的生物发光闪烁和关闭。在化学上,当称为荧光素酶的酶作用于发光化合物,荧光素,在三磷酸腺苷(ATP),镁和氧的存在下会发生生物发光。

对科学家来说,生物发光可以作为一种工具,帮助他们了解许多细胞功能。由于很少有动物或植物细胞自己产生光,所以几乎没有需要关注的背景信号(光)。这种背景的缺乏意味着所有来自样本的光都可以被测量。事实上,生物发光通常是科学家的首选工具,因为它不需要外部光源或特殊的滤光器,而这些是基于荧光的技术所需要的。

Promega的科学家们从1990年开始利用基于萤火虫荧光素酶的荧光素酶生物传感器技术,已经开发了几十年的生物发光工具和检测来支持前沿科学研究。荧光素酶是研究酶如何工作的一个极好的工具,因为它的输出(光)很容易测量:样品被放入一个叫做发光计的特殊仪器中,产生的光量(相对光单位)被记录下来。生物荧光技术可以配置为测量各种细胞生物学,从健康细胞酶活性的特定事件或关闭基因。新的基因操作技术的出现,以及生物荧光的增强理解和更好的荧光素酶的发现和工程,使科学利用生物发光更独特的方式。

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Promega利用欧洲发射ce标记IVD检测微卫星不稳定性的长期经验进行MSI检测

称为微卫星不稳定性,或MSI的遗传异常,已自1993年(1)发现与癌症有关。MSI是插入或缺失的错误在从一个或多个主要的DNA错配修复蛋白(dMMR)内的功能不足在癌细胞和结果微卫星重复序列的积累。这一缺陷,并且将所得的遗传不稳定性,是密切相关的肿瘤的致癌性(2)。

从历史上看微星已经用于筛选Lynch综合征,显性遗传性癌症的倾向。最近,有缺陷的MMR功能的肿瘤已被确定为更可能对免疫抑制剂的检查点(ICI)治疗(3)响应。因为MSI可以是MMR缺陷的第一个证据,MSI-高状态是预测到免疫疗法如ICI疗法的积极响应的。(3)。

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RT-qPCR和qPCR检测病毒等

最近,我们听到了很多关于RT-PCR、RT-PCR和RT-qPCR的东西,这是有原因的。实时逆转录酶聚合酶链反应(Real-Time Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction,简称rRT-PCR)是疾病控制中心(CDC)用于检测COVID-19的技术。real -time RT-PCR,或quantitative RT-PCR (RT-qPCR)*,是一种特殊的PCR技术,它可以在反应发生时可视化扩增靶蛋白(实时),并允许你测量起始靶蛋白的量。你可以阅读更多关于这项技术的基础知识,并观看一个网络研讨会在这里。欲了解更多关于RT-PCR检测COVID-19的信息,请阅读本文博客

qPCR和RT-qPCR都是科学家们可以随意使用的强大工具。这些基本技术被广泛用于研究生物过程。在过去的几十年里,Promega一直支持研究人员使用RT-qPCR和qPCR试剂和系统研究各种疾病新冠肺炎癌症病毒在大象和昼夜节律磷虾

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优化PCR:一个科学家的不太美好的回忆

primer_tubes我进行PCR第一次是在1992年,我完成我的遗传学学士学位,并曾在一个群体遗传学实验室的独立研究项目。我的任务是利用一种新技术,RAPD PCR,区分海葵克隆群试试,Metridium衰老。这些生物可以有性繁殖和无性繁殖,这给种群遗传学研究带来了挑战。我的教授正在寻找一种相对简单的方法来鉴别基因相同的个体(即潜在的克隆)。

PCR仍处于起步阶段。之前没有人在我的实验室曾经试了一下,该部门有一个热循环仪,这是坐落在街对面的大楼。我们有描述RAPD PCR人口工作纸,所以我们点的引物和Taq然后开始磨碎冰冻的海葵碎片以分离DNA。[研磨过程必须用研钵和杵放在液氮中,因为组织必须保持冷冻状态。如果解冻,就会变成一堆无用的恶心的粘稠物——但这是另一个博客的话题。由于我以前从未做过任何步骤,我的教授和我把第一组反应组合在一起。当我们在凝胶上测试结果时,我们得到了各种各样的绷带——这正是他希望看到的。不幸的是,我们意识到我们增加了10倍TaqDNA聚合酶比我们应该使用。我反复放大用正确的量Taq聚合酶,我什么也没看到。继续阅读《优化PCR:一个科学家的不太美好的回忆》

选择正确的殖民地:答案是有蓝色和白色

cloning2啊,克隆的奇迹和挫折。我们都有过这样的经历。经过仔细的计划,你已经创建了包含你感兴趣的DNA序列的克隆质粒,将其转化为细菌细胞,并小心地将这些细胞散布在培养皿中生长。现在你站在你的长椅上凝视着你的杰作:一个装满细菌菌落的盘子。在这些细胞的某个地方是你的DNA序列,快乐地与它的质粒宿主复制。但是等等——逻辑告诉你不是所有的菌落都能包含你的质粒。肯定有几百个殖民地。哪些有你的质粒?你开始恐慌。你脑海中闪过自己老了,头发灰白,仍然在筛选殖民地的景象。 At the next bench, your lab-mate is cheerfully selecting colonies to screen. Although there are hundreds of colonies on her plate as well, some are white and some are blue. She is only picking the white colonies. What does she know that you don’t?继续阅读“选择正确的菌落:答案就在那里,蓝白相间”

体外转录:反应失败的常见原因

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一种广泛应用的分子生物学技术,体外转录利用噬菌体dna依赖的RNA聚合酶合成模板导向的RNA分子。酶如噬菌体SP6、T3和T7 RNA聚合酶用于合成RNA转录本,可作为杂交探针、体外转译应用模板或结构研究(x射线晶体学和核磁共振)。合成的RNA转录本也被用于研究细胞RNA在剪接、RNA加工、细胞内运输、病毒感染和翻译等过程中的功能。

转录反应中的问题会导致转录完全失败(即没有生成转录本)或转录本大小不正确(即比预期的更短或更长)。下面是对体外转录问题最常见的原因的讨论。

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给小鸟们:为小鸟宝宝编织鸟巢可能有助于你的健康

看来,春天终于来到了威斯康星州南部。雪已融化。大多数日子里,它是温暖的话,你可以去外面没有大衣,帽子和手套。树芽开始膨胀。而春天是传统的Oracle,美国的知更鸟(燕雀在树上和院子里都能看到它的身影,还有它不那么友好的表亲红翅黑鸟(Agelaius phoeniceus)。

春天带来了候鸟的回归,同时也带来了更多获救的幼鸟涌入当地野生动物救援组织和人道组织。当幼鸟来到这些中心时,它们需要一个温暖、柔软、透气、可清洗的家,就像它们孵化时的窝一样。

事实证明,针织或钩编的窝是一个完美的解决方案。巢不只是用于幼鸟;兔宝宝,松鼠,蝙蝠,雪貂和浣熊只是一些额外的动物的好处。而最好的部分是,当你创建的安乐窝,你可以改善自己的健康。继续阅读“给小鸟:给小鸟宝宝编织鸟巢可能有助于你的健康”

克隆修饰的平端DNA片段插入T-载体

尾部钝端DNA片段TaqDNA聚合酶可以有效地将这些片段克隆成t载体,如pGEM®- t向量。这种方法也消除了传统的钝端克隆的一些要求——步骤更少,谁能反对这一点呢?

蓝/白菌落筛选帮助你只选择有你插入物的菌落。
蓝/白菌落筛选帮助你只选择有你插入物的菌落。

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超过5000万人死于1918年的大流行——一个世纪之后,我们仍然在寻找一种通用的流感疫苗

一百年前,世界正在采取它的第一个深呼吸,因为它庆祝的贡比涅的第一次世界大战停战结束,于十一月11,1918签约,正式结束四年之久的冲突,夺走的生命800名多万军人(1)。这世界确实没有意识到的是,他们一直在争夺在医院和家比面对战争等领域的士兵任何军队远致命的敌人。

在战争的最后一年,一种致命的流感病毒在全球肆虐,造成5000万至1亿人死亡。

1918年法国流感病房


孩子们来的时候感冒头痛,不到两三天就死了。高大英俊的家伙,健康的男人,刚进来就死了。停战那天晚上,里尔没有什么欢乐的场面。
凯瑟琳·麦克菲修女,她在急诊室工作。11法国里尔附近的圣安德烈(2)。

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学习新事物有关从四岁的男孩线粒体DNA遗传和科学家们的顽强队

我们从母亲那里继承了细胞的线粒体。这些能产生能量的细胞器大量存在于大多数细胞中,这意味着细胞中可能包含数千份与线粒体(mtDNA)相关的DNA副本——这些都是完全遗传自我们的母亲。然而,新的证据表明,这种mtDNA只由母系遗传的大炮原理可能需要进一步完善。这一切都始于一个四岁的男孩。

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