只是什么是RLU(相对光线)?

这篇文章是由嘉宾博客,Scott Messenger, Promega Corporation的技术支持科学家2贡献的。

当您找到一个新的测定以回答重要的研究问题时,实验室总是令人兴奋的时刻。一旦你掌握了测定,证实它将适用于您的实验设置,总是很好。重复技术手册中所示的控制实验是在手中测试测定的好方法。

在运行第一次尝试后,它看起来非常好。控制和治疗的趋势是一致的。时间继续执行实验...但是等待 - rlus(相对光线单元)是比示例数据低的两个数量级!我无法向我的同事向这个数据显示;它不匹配。我做错了什么?

这是我们在技术服务中经常听到的担忧。关注的是真实的,我在使用发光时做一些第一个实验时,我的想法也是如此。当这种问题进入时,技术服务科学家将确保在我们所描述的情况下进行实验,并且在大多数情况下。然后我们开始谈论rlus(相对光线单位)。

继续阅读“只是什么是rlu(相对光单位)?”

xinyabo体育

许多细胞生亚搏体育app怎么下载物学研究人员可以称他们的部门或机构为“细胞培养向导”——拥有20多年经验的技术人员,他们的细胞培养总是没有污染,表现出可靠的倍增率,没有显型或基因型异常。细胞培养需要技巧和经验。原代细胞培养甚至更加困难,许多研究和药物应用都需要原代细胞。

然而,在复制研究结果失败的许多原因中,细胞培养的可变性是突出的(1)。除了细胞培养的正常挑战之外,一场大流行关闭了细胞培养设施,仍然限制了研究人员何时和多久可以监测他们的细胞培养系,细胞培养可变性的问题被进一步放大。

将细胞作为试剂处理

在以细胞为基础的研究中,减少变异性的一个好方法是使用解冻和使用冷冻储存的方法。这包括冷冻大量“储存”细胞,然后进行质量控制测试,以确保它们对处理有适当的反应。然后,当你需要进行化验时,只需解冻那批细胞中的另一小瓶,然后开始化验——就像化验试剂一样!这种方法消除了将细胞培养到特定阶段的需要,后者可能需要数天时间,并引入更多的可变性。

xinyabo体育

给与会者的提示:充分利用虚拟会议

今天的博客是由Guest Bloggers Tara Luther,营销专业遗传身份,博览会和Promega的事件经理的博客。

2020年为我们所有人都有一年的变化。我们学会了如何在物理疏远的同时保持联系。我们学会了如何与毛茸茸的同事一起从家里工作,他们鼓励我们摆脱传统的9-5常规。我们学会了如何对我们的实验室进行更改以保持安全和生产力。

对于我们众多,这也将是我们第一次参加虚拟会议。虽然很容易专注于我们不会聚集在一起的东西,但有利于移动到虚拟空间的优势。通过充分利用您的虚拟体验,您将能够在您自己的实验室中使用宝贵的见解,强大的网络和洞察力。

为了帮助你,我们整理了一份建议清单,可以帮助你在参加任何虚拟会议时最大化你的体验。

继续阅读“与会者的提示:充分利用虚拟会议”

回到替补席

今天的博客是由技术服务科学家,Joliene Lindholm,PHD编写的。

我们许多人在夏天的野外工作或度假休息后回到了实验室,但通常有人在实验室登记,以确保凝胶电泳盒没有完全溢出死虫,水浴不是令人兴奋的新藻类完全超越。也许这只是因为我在一个昆虫学部门的老大建筑中工作,但为什么昆虫这样运行缓冲区?有些实验室在这一点上完全关闭了几个月,或者可能只是一些基本人民一直在储存股票和殖民地。一些实验室适应了新的正常和开发的指导方针,以使研究人员安全,同时在实验室中仍然在做重要工作。看看如何Promega科学应用小组一直保持着这种平衡

回到实验室替补席?花一些时间来确保您拥有启动研究项目所需的一切。

以下是我在一段时间的实地工作后,在管理实验室时学到的一些技巧,帮助我重新回到工作中:

继续阅读《回到法官席》

在汗衫中获得博士学位:苏珊娜哈里斯博士的客人博客

今天的博客由苏珊娜·哈里斯(Susanna Harris)客座撰写,她最近在北卡罗来纳大学教堂山分校(University of North Carolina in Chapel Hill)为自己的博士论文进行辩护。


我刚刚为我的博士学位辩护。将近六年的血汗和泪水,大部分都是在我坐在实验室的桌子前,面对着北卡大学教堂山足球场时用kimwipe擦干净的。将近六年的工作,都可以用几张幻灯片总结出来。我向我的朋友、家人和同事解释了我近六年的工作——这是我从2014年秋天开始就梦想的一刻。

我没有梦想过什么?我将坐在房间角落里我的小办公桌前,除了我那鼾声如雷的狗,没有任何听众。再也不会有晚宴庆祝活动在富兰克林街度过一个欢乐的夜晚。因为我的名字从女士变成了哈里斯医生,所以我要穿着运动裤,不让辩方观众看到。

图为苏珊娜毕业论文答辩的观众。

为什么我在壁橱里有任何东西都可以穿汗衫?因为我觉得这很搞笑。我相信这种情况将结束,我们将在世界历史上极度困难的时期中吸取的回忆和经验教训。我想和一个更荒谬的故事走开,增加了一个长期以来的“甚至是什么?”来自Grad School的故事。

在任何时候努力工作;让我们不要假装这种流行病不会让事情变得更糟。我很幸运,我的顾问有很多方法已经将我们的实验室移到了一个新的状态2019年,让我通过网络摄像头调整到会议,并在流行语改变所有北卡罗来尼亚人的生活之前。这使我是一种独特的视角,可以挑剔距离工作的问题,并且是更安全的订单的结果。根据我的经历,这里有几个提示,技巧和警告的话。

继续阅读获得运动裤博士学位:苏珊娜·哈里斯博士客座博客

新冠肺炎疫情期间的会议

与Covid-19大流行相关的旅行和事件限制导致许多科学会议被取消,延迟或调整为虚拟事件。这些会议包括毒理学学会(SOT),美国癌症研究人员(AACR),实验生物学(EB)和生物制药新兴的最佳实践协会(BEBPA)生物测定会议中的毒理学学会。对于最新的信息,我们建议您使用每次会议的主机进行检查。

这些取消已经打乱了许多科学家展示研究成果、与潜在合作者接触以及与供应商互动的计划。在Promega,我们对失去的机会很敏感,目前正在探索创造这些体验的潜在方法,尽管许多会议被取消。

“我们希望人们能够直接与我们谈谈,并在会议上与密切谈话相同的温暖感觉,但没有面对面,”艾莉森·博览会经理艾莉森说。“我们正在看着不同的选择来拥有同样的会议感觉,但没有展示在我们身边。”

为了充分利用我们建立解决方案的时间,我们向帕姆加科学家们在您无法参加会议时保持联系和通知。这是我们聚集的一些想法。

继续阅读“Covid-19时的会议”

提高新十年的科学素养

科学每天都会触动我们的生活。但是太多的科学概念和术语被误解并使用不正确。即使是我们穿着“科学家”徽章的人甚至有时候是挪用的误判,这可以采取滥用。

对我们所有人来说,基本的科学素养是非常重要的。为什么?因此,当社交媒体网站上充斥着关于疫苗接种或气候变化的评论时,我们能够筛选术语,了解什么是正确的,什么是不正确的,并根据事实和网络流言做出决定。只要有一点基本的科学术语知识,你就能更好地防范欺骗,你也会知道如何区分事实与虚构。

以下是一些通常误解和滥用的一般科学术语。

继续阅读“改善新十年的科学素养”

克隆钝端的DNA片段很难:PGEM®-T矢量可以使其更容易。

用校对聚合酶进行PCR扩增PFU.DNA聚合酶,会给你带一个钝的末端。但是,另一种热稳定的DNA聚合酶,如Taq.DNA聚合酶,将单个核苷酸碱添加到DNA片段的3'末端,通常是腺嘌呤,产生“A”悬垂。这个“A”悬垂可以在克隆片段时造成困难,这是你的最终目标。你可能会考虑创建一个钝器klenow.或者通过设计引物在PCR片段的末端添加限制性酶切位点。但为什么要经历那么多的步骤呢,因为A的存在可以有效地将这些片段克隆成t向量,比如pGEM®- t向量?更少的步骤?谁能争辩?

继续阅读“克隆钝端的DNA片段很难:PGEM®-T矢量可以使其更容易。”

成功双记者测定的提示

前面,我们描述了一些使用双报告试剂的优点(如那个Dual-Luciferase®,双格洛®荧光素酶Nano-Glo®Dual-Luciferase®系统)。另一个帖子描述了如何选择最佳的双报告试剂为您的实验。概述基于荧光素酶的报告基因测定,参见这次短视频:

这些测定原则上相对容易理解。使用瞬时转染到您最喜欢的哺乳动物细胞系中的主要和次要记者矢量。主要报告者通常用作基因,启动子或感兴趣的响应元素的标志物。次要报告者驱动不同标记的稳定表达水平。我们可以使用第二标记来规范主要标记不受在实验操纵的内容的假设下初级表达的变化。

虽然双记者测定有许多优点,但他们需要仔细规划以避免常见的缺陷。以下是您可以做些什么来避免重复我们与新用户看到的一些常见错误:

继续阅读“成功的双记者分析提示”

T-矢量克隆:问题,答案和提示

蓝色/白色殖民地筛选帮助您只选择具有插入件的殖民地。

问:是否可以使用GOTAQ DNA聚合酶产生的PCR产物用于T-载体克隆?

答:是的。gotaq®DNA聚合酶是未经修饰的Taq聚合酶的稳健配方。GoTaq®DNA聚合酶缺乏3 '→5 '外切酶活性,并显示末端转移酶活性,添加一个3 '脱氧腺苷(dA)到产品末端。因此,PCR扩增产物使用gotaq®DNA聚合酶(包括GoTaq®福莱希gotaq®G2.聚合酶)将含有A型突出,这使得它们适用于与PGEM®-T(猫。#A3600), pGEM®-T Easy (Cat.# .A1360)和pTARGET™(Cat.# .A1410)向量。

继续阅读“T-Vector克隆:问题,答案和提示”