DNA模板长度如何影响细胞自由系统中的基因表达?

无细胞系统中偶联转录/翻译的三维草图。最近的一篇论文研究了DNA模板长度对基因表达的影响。

无细胞基因表达系统是研究人员寻求了解转录和翻译的调控的主板工具。许多因素可以影响无细胞基因表达的效率,包括载体序列,反应组分和模板DNA浓度。未经广泛研究的一个因素是DNA模板长度如何影响基因表达。

最近的一项研究Nishio等人。利用线性化报告载体末端编码萤火虫荧光素酶研究DNA模板长度如何影响无细胞系统中的基因表达(Luc.).本研究比较的模板长度分别为:1717 bp、4331 bp和25690 bp (Luc.1.7 k,Luc.4.3K和Luc.25)。Nishio等人。发现表达水平来自Luc.25.7k比与此高1000倍Luc.1.7k,表明对于较长的模板,每个靶基因的蛋白产量提高了1000倍,Luc.25.7 k。在他们的比较中Luc.1.7 k和Luc.4.3k时,他们也注意到表达水平的增加Luc.4.3k。作者表明该研究中的较长的DNA分子表现出“收缩构象”,其有效地增加了DNA周围的RNA聚合酶和NTP的局部浓度。

方法

进行无细胞基因表达TNT®T7快速耦合转录/翻译系统.TNT®耦合的转录/翻译系统提供了一种简化和加速的方法来进行体外蛋白质翻译。这些系统已被证明是有用的许多下游应用,包括但不限于谷胱甘肽-S-转移酶(GST)下拉,凝胶移位测定,共免疫沉淀,蛋白质修饰的表征,蛋白质:蛋白质和蛋白质:核酸相互作用和蛋白质活性研究。使用该测量荧光素酶的水平荧光素酶测定系统

文献引用

  1. Nishio,T.,Yoshikawa,Y.,Yoshikawa,K。等等。(2021)更长的DNA对无细胞基因表达表现出更大的潜力科学培训11,11739
以下两个选项卡更改以下内容。

Gary Kobs.

战略营销经理Promega Corporation
加里赢得了他的B.。在1982年的UW-Madison中,1982年至1986年,他在UW-MOMISON担任研究科技。从1986年到目前的加里一直在帕尔梅斯公司为许多能力提供服务,包括作为Promega笔记的第一个编辑。他还是经理技术服务和培训,产品经理限制/改性酶,产品经理蛋白质分析,现在是营销经理蛋白质分析。亚搏足彩

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