哦,你可以“Glo”的方式

在Promega,我们已经使用灵敏度高、动态范围广的生物发光检测方法帮助您的实验“Glo”30年了。然而,我们发现,许多科学家仍然更熟悉比色或荧光检测等老技术,而不是发光。今年是我们的周年纪念,我们将盘点发光技术所带来的所有分析和应用。看看我们30年和Glo-ing庆祝活动了解有关我们今年庆祝发光测定和技术的更多信息。

为什么你应该说“让它成为”glo“”

发光检测方法更敏感,因为它们不需要荧光方法的激发或过滤,并且不会遭受比色方法的检测限制。发光测定具有非常低的背景信号,您只需检测发出的所有光线。大多数荧光素酶具有宽的发射光谱,因此没有使用过滤器,并且包括跨越所有波长的光。

我们的glomax®仪器以及大多数高质量的光度计,包含光电倍增管(PMT),其放大允许测量非常低的信号的信号。此外,GLOMAX®仪器灵敏度(增益)自动调节,以便在同一个板上测量非常低且非常高的信号。

发光计的发光探测范围比较
光度计检测范围的比较

固体白色板是最好的发光分析,因为它将有助于反射所有的光到阅读器。根据仪器的不同,发光允许在7-9个测井信号的广泛动态范围内检测非常小的变化。这个强大的工具有助于确保您可以自信地检测您的实验中的显著差异。

你可以在哪里“Glo”

飞越彩虹

科学家已经将荧光素酶反应与细胞生物学中许多重要的测定方法结合起来。亚搏体育app怎么下载最初,荧光素酶测定是为了测量荧光素酶本身的表达。荧光素酶的表达可以偶联到基因表达导致广泛的阵列生物发光报告器基因测定。现在有一个彩虹的荧光素酶报告酶在不同的应用中进行选择,并在双报告分析中一起使用。

除基因报告基因分析外,该技术也是基因检测的基础生物分析。这些测定依赖于荧光素酶报告者,所述荧光素酶报告者偶联于作用信号传导途径的机制,以测量新癌症治疗等治疗的功能生物响应。

荧光素酶的表达甚至可以使用生物荧光成像在活细胞或整个动物和植物中!

三种不同荧光素酶的反应说明
三种荧光素酶

寻找生命的奥秘

发光信号不仅可以与荧光素酶本身结合。分析还可以使用关键的反应组分,如必要的辅助因子和底物。下一个荧光分析家族使用ATP作为产生发光的限制因子,并过量添加荧光素酶。

在发光ATP测定,发光信号取决于可用ATP的量,所以它与活细胞的数量成正比。该技术可用于监测细胞活力和代谢或检测微生物污染。ATP检测的基础也已经通过其他循环酶偶联到广泛的细胞信号传导能量新陈代谢化验。

许多细胞健康分析已偶联到一个修饰的荧光素底物上,该底物在用于荧光素酶反应之前需要被感兴趣的酶处理。如果你对改变ATP水平或依赖于蛋白质活性的过程感兴趣,那么你可能会把它命名为Glo。

寻求联系

在没有外部激发源的情况下,发光也可以与荧光协同工作来测量蛋白质或分子之间的连接。在生物荧光共振能量转移(BRET)过程中,荧光素酶可以作为能量供体靠近荧光受体荧光团。

优化的Nanobret™技术允许增加信号和更低的背景来测量蛋白质:蛋白质相互作用蛋白质细胞目标接触活细胞中的小分子!发光工具箱的最新添加是工程NanoLuc®二进制技术(NanoBiT®),由专门为低或高亲和互补选择的独特亚单元组成。当这些亚基聚集在一起时,它们就形成了一个功能性的NanoBiT®发光酶。

低亲和互补对也有用检测天然蛋白质相互作用。微小的亲和力hibit®,亚基将驱动与其互补的对的相互作用,因此可以使用它标记蛋白质进行定量。仅在11个氨基酸中,HIBIT®标签足够小,以便简单的CRISPR介导的标签敲击敲击,以检查内源性蛋白质表达和降解。

最近,Nanobit®形成了简单的基础Lumit™方法用于抗原或抗体检测。基于发光的分析是真正地连接在一起的碎片,帮助科学家研究复杂的过程,使用更多的生物学相关的方法比以往任何时候。

Lumit技术的插图
Lumit™技术的插图

我们很乐意收到你的发光测定如何让你的研究“Glo”-in。您可以通过技术服务到达科学家电话、聊天或电子邮件。如果您不确定如何获得“Glo”-ing,我们甚至可以通过CoLABorate培训项目。我们期待与您进行技术交流!


朱莉安·林德霍姆是Promega公司的技术服务科学家。在加入Promega之前,她在威斯康星大学麦迪逊分校(University of Wisconsin-Madison)获得了昆虫学博士学位,研究一种昆虫激素的分子作用模式。她说:“我的工作最棒的地方就是了解科学家正在研究的所有有趣的项目;总有一些新的和令人兴奋的东西,我可以帮助他们成功的目标。“


了解我们最近博客的Promega的发光研究史,“庆祝“发光”研究30周年”


要了解有关过去30年的生物发光创新和他们启用的发现,请访问我们的30周年庆典页面


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技术服务科学家II Joliene赢得了她的博士学位。在将Promega作为技术服务科学家加入Promega之前,研究威斯康星州 - 麦迪逊大学的昆虫激素的分子作用的分子作用。她说:“我的工作最好的事情正在了解科学家正在调查的所有有趣的项目;总有一些新的和令人兴奋的东西,我可以帮助他们成功的目标。“当她不忙于照顾她的宠物,鸭子和老鼠时,她享受跳舞和终极运动。

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