哦,你可以“Glo”的方式

在Promega,我们已经使用灵敏度高、动态范围广的生物发光检测方法帮助您的实验“Glo”30年了。然而,我们发现,许多科学家仍然更熟悉比色或荧光检测等老技术,而不是发光。今年是我们的周年纪念,我们将盘点发光技术所带来的所有分析和应用。看看我们30周年庆典了解更多关于今年我们如何庆祝发光分析和技术。

为什么你应该说“让它成为Glo”

发光检测方法更敏感,因为它们不需要像荧光方法一样需要激发或过滤,也不受比色法的检测限制。一个发光试验有一个非常低的背景信号,你只是检测所有发出的光。大多数荧光素酶具有较宽的发射光谱,因此不使用滤光片,包括所有波长的光。

我们的GloMax®工具和大多数高质量的光度计一样,它包含一个光电倍增管(PMT),可以放大信号,允许测量非常低的信号。此外,GloMax®仪器的灵敏度(增益)是自动调整的,因此它可以在同一板上测量非常低和非常高的信号。

发光计的发光探测范围比较
光度计检测范围的比较

坚固的白色板是最适合发光测定的,因为它有助于将所有光线反射到读者身上。提示允许在7-9个日志中检测到宽动态信号范围内的非常小的变化,具体取决于仪器。这种强大的工具有助于确保您可以自信地检测到您的实验中的显着差异。

你可以在哪里“Glo”

彩虹之上

科学家已经将荧光素酶反应与细胞生物学中许多重要的测定方法结合起来。亚搏体育app怎么下载最初,荧光素酶测定是为了测量荧光素酶本身的表达。荧光素酶的表达可以偶联到基因表达导致广泛的阵列生物荧光报告基因分析。现在有一个荧光素酶报告酶的彩虹在不同的应用中进行选择,并在双报告分析中一起使用。

除基因报告基因分析外,该技术也是基因检测的基础生物分析。这些检测依赖于荧光素酶报告物结合作用信号通路的机制来测量治疗如新的癌症治疗的功能性生物学反应。

荧光素酶的表达甚至可以用于生物发光成像在活细胞或整个动植物中!

三种不同荧光素酶的反应说明
三种类型的荧光素酶

寻找生命的奥秘

发光信号可以偶联至于荧光素酶本身的更多。测定还可以使用关键反应组分,例如必要的辅因子和基材。下一代发光测定使用ATP作为产生发光的限制因子,并且荧光素酶被加入过量。

在发光ATP化验,发光信号取决于可用ATP的量,因此它与活细胞数量成比例。该技术可用于监测细胞活力和新陈代谢或检测微生物污染。ATP检测的基础也通过其他循环酶偶联以连接到各种各样的循环酶细胞信号传导能量代谢测定。

许多细胞健康测定已联系到改性的荧光素底物,其需要通过感兴趣的酶处理,然后可用于荧光素酶反应。如果您对改变ATP水平或依赖蛋白质活动的过程感兴趣,那么您可能会使它“GLO”。

寻求连接

发光还可以与荧光一起工作,以测量蛋白质或分子之间的连接,而没有外部激发源。荧光素酶可以作为能量供体,在称为生物发光谐振能量转移(BRET)的过程中紧密接近受体荧光团。

优化后的NanoBRET™技术可以增加信号和降低测量背景蛋白质:蛋白质相互作用并且蛋白质细胞目标接触活细胞中的小分子!发光工具箱的最新添加是工程NanoLuc®二进制技术(NanoBiT®),由专门为低或高亲和互补选择的独特亚单元组成。当这些亚基聚集在一起时,它们就形成了一个功能性的NanoBiT®发光酶。

低亲和互补对也有用检测天然蛋白质相互作用。高亲和的微小的HiBiT®亚基将驱动与它的互补对的相互作用,所以它可以用来标记蛋白质进行定量。HiBiT®标签只有11个氨基酸,足够小,用于简单的crispr介导的标签敲入,以检测内源性蛋白质的表达和降解。

最近,NanoBiT®形成了简单的基础Lumit™方法用于抗原或抗体检测。发光的基础测定真正将这些碎片连接在一起,帮助科学家使用比以往任何时候的更具生物学相关方法研究复杂的过程。

Lumit技术说明
Lumit™技术说明

我们很乐意听到你关于发光分析如何使你的研究“Glo”-ing。您可以通过以下方式联系技术服务部的科学家电话,聊天或电子邮件。如果您不确定如何获得“Glo”-ing,我们甚至可以通过以下方式为您的实验室提供个性化研讨会覆富有培训计划。我们期待与您进行技术交流!


朱莉安·林德霍姆是Promega公司的技术服务科学家。在加入Promega之前,她在威斯康星大学麦迪逊分校(University of Wisconsin-Madison)获得了昆虫学博士学位,研究一种昆虫激素的分子作用模式。她说:“我的工作最棒的地方就是了解科学家正在研究的所有有趣的项目;总会有一些新的、令人兴奋的东西,我可以帮助他们实现目标。”


在我们最近的博客中了解Promega关于发光研究的历史,“庆祝30年的”glo-ing“研究”


想要了解更多关于过去30年生物发光的创新和发现,请访问我们的30周年庆典页面


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技术服务科学家II Joliene在作为技术服务科学家加入Promega之前,在威斯康星大学麦迪逊分校获得昆虫学博士学位,研究昆虫激素的分子作用模式。她说:“我的工作最棒的地方就是了解科学家正在研究的所有有趣的项目;总会有一些新的、令人兴奋的东西,我可以帮助他们实现目标。”她喜欢跳舞,在她不忙的时候玩极限游戏,她的宠物包括蟑螂,鸭子和老鼠。

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