克服在三维细胞结构中检测凋亡的挑战

本博客由嘉宾作者,Promega公司高级产品经理Maggie Bach撰写。

研究人员越来越依赖于三维(3D)结构种植的细胞,以帮助回答他们的研究问题。单层或2D细胞培养物是过去世纪的进入细胞培养方法。现在,在体内条件下更好地代表的需要是推动采用3D细胞培养模型.在3D结构中生长的细胞更好地模拟组织状结构,更好的表现出分化的细胞功能,更好地预测对药物治疗的体内反应。

切换到3D细胞文化模型具有挑战。询问这些模型的方法需要适应许多类型的3D模型可适应和可靠。一些最流行的3D模型包括在超低附着板中生长的球形,并且在细胞外基质中生长的细胞,例如Matrigel®。甚至更复杂的模型包括介质流过微流体或片内装置中的细胞。最初为在单层种植的细胞开发的测定是否与各种3D模型一致地执行?当与单层生长相比,当细胞在3D模型中生长细胞时,如何测量细胞标记物?

关闭在3d培养设备的细胞。3D细胞结构为测量细胞活动标记提供了挑战
3D细胞结构为测量细胞活动标记提供了挑战

测量Caspase-3活性以检测3D细胞结构中的细胞凋亡

研究人员想要与3D模型进行询问的一个这样的标记是Caspase 3活动。Caspase 3活性是细胞凋亡或编程细胞死亡的标志物。如果药物治疗激活Caspase 3并诱导细胞凋亡,它可能是一种有效的癌症药物。由于3D细胞培养更好地模仿肿瘤细胞生长,癌症研究人员越来越多地测试用3D模型激活Caspase 3的潜在药物。

Caspase-Glo®3/ 7 3D测定最近被引入帮助研究人员通过测量Caspase-3活性来检测3D细胞结构中的细胞凋亡。新的3D标记版本的测定基于最初为单层细胞培养开发的化学性。为了确保新的测定产生多种3D模型的可靠结果,在球状体和Matrigel-嵌入组织中生长一组细胞面板。评估包括溶解的参数,信号线性和剂量 - 反应关系,以确保测定试剂可以与各种3D模型一起使用。

此外,用药物处理不同尺寸的3D球形,以了解尺寸差异如何影响凋亡反应。结果表明,Panobinostat(经批准的化学治疗药物)诱导的肝癌细胞球体(HepG2)中的凋亡信号与球状尺寸成比例。较大的球状体更容易受到药物治疗的影响,表明球状体的尺寸会影响细胞如何应对药物。数据增强了切换到3D模型的优点,这更好地模仿了我们身体中的细​​胞或肿瘤的生长,并且是研究癌症治疗的研究人员更好的模型。

有兴趣学习更多吗?查看此科学海报中的更多数据:Caspase-Glo®3/7 3D:用于球形和Matrigel®包埋组织的验证或探索更多关于3D细胞培养的资源Promega的3D细胞文化指南


相关的帖子

以下两个选项卡更改以下内容。
Promega产品由生活科学家使用,这些科学家们向生物过程和科学家们向诊断和治疗疾病的科学家询问生物过程和科学家,发现新的治疗方法,并使用遗传和DNA测试进行人体鉴定。最初是,在美国威斯康星州麦迪逊成立于1978年,Promega在16个国家设有分支机构,50多家全球经销商提供100个国家。

由Promega提供的最新帖子看到所有

发表评论

本网站使用AkisMet减少垃圾邮件。了解如何处理评论数据