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许多细胞生亚搏体育app怎么下载物学研究人员可以命名他们的部门或机构的“细胞文化巫师” - 具有20多年的经验,其细胞培养总是没有污染的经验,表现出可靠的倍增率并且没有表现出表型或基因型奇怪的奇妙。细胞文化采用技巧和经验。原发性细胞培养物仍然更加困难,许多研究和药物应用需要原代细胞。

然而,在复制研究结果失败的许多原因中,细胞培养的可变性是突出的(1)。除了细胞培养的正常挑战之外,一场大流行关闭了细胞培养设施,仍然限制了研究人员何时和多久可以监测他们的细胞培养系,细胞培养可变性的问题被进一步放大。

将细胞作为试剂治疗

减少基于细胞的研究的可变性的好方法是使用解冻和使用的冷冻储备方法。这涉及冻结大量的“库存”细胞,然后进行质量控制测试,以确保它们适当地响应治疗。然后,只要你需要进行测定,就可以从该批次中解冻另一个小瓶并开始测定 - 就像一个测定试剂一样!这种方法消除了将您的细胞生长到特定阶段的需要,这可能需要数天并引入更多可变性。

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如何减少细胞培养变异性

场景1:杰克需要一个MCF-7细胞的烧瓶进行测定,因此他向研究生ListServ询问细胞的邮件发送给电子邮件。梅丽莎回复她有一个额外的细胞瓶,她可以分享。杰克愉快地接受细胞并开始他的实验。

场景2:迈克尔昨天通过了他的细胞,根据规程,今天应该为治疗准备细胞板。然而,他之前的实验被推迟了,所以他决定明天把它们装盘。细胞看起来很健康,所以应该没问题。

上述场景有什么问题?这些行为可能看起来无害,但它们可能是变化的原因,导致不可复制的结果。继续阅读《如何减少细胞培养的可变性》

使用Camp-Glo™测定时HEK293细胞培养的实用提示

HEK293细胞稳定表达Halotag®-ECS(细胞外表面;由A组成标记β1-整合蛋白的信号序列和单跨膜结构域与HaloTag®Alexa Fluor®488配体,然后成像。
HEK293细胞稳定表达Halotag®-ECS(细胞外表面;由A组成
标记β1-整合蛋白的信号序列和单跨膜结构域
与HaloTag®Alexa Fluor®488配体,然后成像。
G蛋白偶联受体是细胞表面受体中最大的一类,也是药物靶标中最重要的一类。前200种药物中有50种靶向GPCRs。GPCRs对光线、气味、激素、神经递质等各种刺激产生反应。它们几乎涵盖了所有的治疗领域。当一种特定的GPCR与一种疾病有关时,研究人员对GPCR及其信号通路进行筛选,希望能够识别出有希望的治疗靶点。主要的g蛋白家族通过cAMP等次级信使传递信号,进而激活一系列效应系统来改变细胞行为和/或基因转录。研究GPCRs和检测细胞内cAMP的增减有多种途径和方法。然而,在所有的方法中,最快和最敏感的是基于板CAMP-GLO™测定继续阅读“使用Camp-Glo™测定时HEK293细胞培养的实用提示”

防止细胞系误识别的心痛

黄金面具这是科学家的噩梦:花费时间和资源去调查一种生物现象,结果却发现你的细胞并不是你认为的那样——它们的真实身份被隐藏了。因此,您使用这些单元格生成的所有数据,无论是已发布的还是未发布的,都将受到质疑。你以为你了解你的细胞,你可以信任它们,但你的信任错了。在某些时候,也许甚至在叛逆细胞系进入你的实验室之前,这些细胞被错误标记、错误识别或被另一种细胞系污染了。事情本不必变成这样的。这里有一些简单的步骤,你可以采取,以防止头痛和心痛的细胞系错误识别和污染。

继续阅读《防止细胞系错误识别带来的心痛》

成功的细胞分析的考虑I:选择你的细胞

对于我们从经典或分子遗传学背景中进入基于细胞的测定的世界,细胞培养的世界可能是令人生畏的。然而,真正了解特定表型的基因突变如何工作,我们需要看看所有发生的生物化学和细胞生物学:细胞。亚搏体育app怎么下载

本系列博客将涵盖在设计基于细胞的分析时需要考虑的几个主题。在这第一部分中,我们将讨论选择细胞类型的基础。继续阅读“基于细胞的成功测定的注意事项I:选择您的细胞”

邋技术人员和科学的进步

然后,1953年,德克萨斯州的遗传学家意外地将错误的液体混合了Hela和少数其他细胞,结果证明是一个幸运的错误。细胞内部的染色体膨胀并展开,这是第一次,科学家可以清楚地看到他们每个人。-rebecca skloot,Henrietta的不朽寿命缺乏

斯克鲁特女士,这样戏弄遗传学读者是不公平的。德克萨斯州的科学家是谁?是什么液体出了问题?科学家花了多长时间才意识到他的错误已经开创了整个细胞遗传学领域?这个好奇的人想要知道。继续阅读“邋技术人员和科学的进展”

细胞,特异性和7岁儿童的大脑

我们都认为具体是重要的。但有时候对特定的重要事项并不是那么容易达成一致。

我七岁的儿子是一个很好的例子。继续阅读“细胞,特异性和七岁的大脑”