毛细管电泳在您的工作台

光谱光谱CE系统

这里有一个好消息:频谱紧凑CE系统现在可以从Promega。

这里有一个更好的消息:各种规模的实验室现在都有机会用个人的台式仪器进行桑格测序和片段分析。

没有坏消息。

继续阅读“台式毛细管电泳”

如何减少细胞培养变异性

场景1:杰克需要一个MCF-7细胞的烧瓶进行测定,因此他向研究生ListServ询问细胞的邮件发送给电子邮件。梅丽莎回复她有一个额外的细胞瓶,她可以分享。杰克愉快地接受细胞并开始他的实验。

场景2:迈克尔昨天通过了他的细胞,根据规程,今天应该为治疗准备细胞板。然而,他之前的实验被推迟了,所以他决定明天把它们装盘。细胞看起来很健康,所以应该没问题。

上述场景有什么问题?这些行为可能看起来无害,但它们可能是变化的原因,导致不可复制的结果。继续阅读“如何减少细胞培养变异性”

细胞系识别危机:老问题,新问题

如果您使用Cell Lines,您可能会注意上个月在在线日记帐统计中发布的戏剧性标题,成千上万的研究使用了错误的细胞,期刊正在做29981164——吹口哨没有什么在他们的专栏里监察者 (伊万·奥兰斯基(Ivan Oransky)和亚当·马库斯(Adam Marcus)指出,科学家继续使用被污染或被错误识别的细胞系发表研究。最近的估计发现,科学家使用的错误识别细胞系的百分比高达20到36。在这里,没有揭发的同行评审期刊受到了指责。作者们呼吁期刊“对受影响的数千项研究做出某种免责声明”。

这不是一个新的索赔。在各种渠道之前,缺乏认证的细胞系误识别的继续问题。这很容易找到新闻宣贯又缩回出版。yabovipcom亚搏足彩Promega Connections已发布若干博客帖子,即最近的博客帖子,如去年:你#验证吗?这篇文章描述了期刊的大胆举动自然采用围绕cell line身份验证的新策略。从2015年5月开始,该杂志要求所有投稿的作者确认他们研究中使用的细胞系的身份,并提供关于其细胞系的来源和测试的详细信息。继续阅读“细胞系标识危机:旧问题,新关注”

细胞系的错误识别又出了问题

癌细胞图返回2009年,我们报告了细胞系污染问题(1)。在这篇文章中,我们报告了估计的15-20%的统计数据,研究人员使用的细胞系被错误鉴定或与另一种细胞系(1)交叉污染。这对数据解释和实验的再现性来说,这提出了一个巨大的问题,是科学过程中的一个关键支柱。我们已经重新审视了这一主题多次,突出显示单元格和组织存储库已发现,并在提交给他们的细胞系(2)并讨论ANSI(3,4)对研究人员讨论关于在实验过程中的研究人员的新指南,细胞系应该是认证和识别细胞系的方法是可接受的。

就在最近,两篇论文被作者自愿撤回,因为实验室使用的细胞系之间存在交叉污染。第一次引起我注意的是第一次撤回自然方法在它的九年的出版物中。在本文中,用表达GFP的HEK细胞交叉污染初级胶石细胞系,导致与肿瘤引发性相关的“未解释的自发荧光”(5)。第二张纸,缩回癌症研究在这篇文章中,一个基因被错误地描述为肿瘤抑制因子,当沉默时,它会导致裸鼠体内肿瘤的形成。事实证明,被污染的HEK细胞也没有表达同样的基因。

因此,由于细胞系的交叉污染,两组具有自愿缩回的纸。开放,诚实地了解了细胞系的发生,并达到缩回文件的决定不可能是一件容易的事情,但这些决定在许多方面使科学界受益。显然,他们使研究人员有利于通过防止研究人员追求导致死角的路径来努力研究论文的具体研究问题。但在较大的图像中,这些撤回加强了细胞系认证需要成为常规和接受的任何实验过程的部分,如果我们对实验结果有信心,那么依赖于细胞培养的任何实验过程。

参考文献

  1. 邓汉姆,J.H.和古思米勒,P. (2009)做好科学:验证细胞系标识Promega笔记10115日。
  2. Duham,J.H.和Guthmiller,P。(2012)做好科学:验证细胞系标识。Promega PubHub。[互联网:2013年9月访问]
  3. Gopal,A。(2013)指纹识别您的细胞系。亚搏足彩博客[互联网:2013年9月访问]
  4. SundQuist,T.(2013)防止细胞系污染带来的心痛亚搏足彩博客[互联网:2013年9月访问]
  5. Evanko,D.(2013)由细胞系污染引起的缩回Methagora博客。[2013年9月互联网接入]
  6. Negorev,D。(2013)收缩:Sp100作为一个强有力的肿瘤抑制因子:通过调节胚胎干细胞程序加速人类成纤维细胞的衰老和快速恶性转化可以。Res73., 4960年。

“指纹鉴定”你的细胞系

在实验室工作当我说在显微镜下观察细胞并识别它们的名字几乎是不可能的时候,研究永生细胞系的研究人员很容易同意我的说法。有表型性状,但它们确实随着培养基组成、传代数和对生长因子的响应而改变。我还记得我的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y在接受神经生长因子治疗后表现出的漂亮的分支。因此,外表并不是一个显著的特征。目前,在许多实验室中,研究人员通常使用多个细胞系,而且很有可能共享同一个实验室空间来传代细胞,并使用同一个培养箱来培养细胞。在这种情况下,不难想象细胞系可能被错误标记或交叉污染。例如海拉细胞,一种生长最快的细胞系已经被证明可以入侵并超过其他细胞系。

细胞系的错误识别有深刻而严重的影响。一项对用于食管癌研究的细胞系的综述发现,大量的细胞系实际上来源于肺癌或胃癌。不幸的是,当这个错误被发现时,来自这些细胞系研究的数据已经被用于临床试验和其他先进的研究和出版物。此外,这些细胞系本来是用来筛选、设计和测试特定癌症药物的,但最终在临床试验中失败了。继续阅读“指纹识别”你的细胞系

细胞,特异性和七岁的大脑

我们都同意,具体是重要的。但有时候,具体什么是重要的并不是那么容易达成一致。

我七岁的儿子是一个很好的例子。继续阅读《细胞、特异性与7岁儿童的大脑》