最大化你的时间在实验室:全面提高实验重复性与解冻和使用的细胞

许多细胞生亚搏体育app怎么下载物学研究人员能够说出自己部门或机构的“细胞培养向导”诚,技师20多年的经验,其细胞培养物总是不受污染,表现出可靠的倍增率,且没有表型或基因型的怪事。细胞培养需要技巧和经验。原代细胞培养能够更加困难的是,许多研究和制药应用需要原代细胞。

然而,不重复的研究结果的诸多原因中,变异的细胞培养中脱颖而出(1)。添加到细胞培养的正常挑战大流行关机细胞培养设施和仍然限制时间和频率的研究人员可以监控他们的细胞培养系和细胞培养可变性的问题进一步放大。

治疗细胞试剂

在以细胞为基础的研究中,一种减少变异的好方法是使用冷冻储存的方法。这包括冻结大量的“储存”细胞,然后进行质量控制测试,以确保它们对处理有适当的反应。然后,无论何时你需要进行试验,只要从那批细胞中解冻另一小瓶细胞,然后开始试验——就像试验试剂一样!这种方法不需要将细胞生长到一个特定的阶段,这个阶段可能需要几天的时间,而且会带来更多的可变性。

生物制药行业已经走向thaw-and-sue冷冻细胞的使用作为一种方法来减少可变性(3)。化验使用主细胞是乏味的开发和难以解释,并使转基因细胞模型与克隆细胞系多年来一直是常见的做法。为了节省培养中维持细胞系的成本和资源,在生物测定法(生物测定法用于监测一种物质或生物制剂的长期活性,以确保一致性)之前,要准备和使用冷冻的培养细胞库。

解冻和使用的电池的优点

对于依靠培养的细胞的任何研究的逻辑提前是考虑细胞作为关键试剂和提供他们在受控条件下制造,并且在大致相同的方式的其他试剂,例如介质,补充和血清进行测试QC-测试性能。冷冻,解冻和使用的格式已经由专门从事生产的细胞产生更多一致的响应和帮助尽量减少检测到试验变化制造商通过严格的质量控制检测了细胞,研究人员对研究人员甚至lab-到实验室。


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使用使用细胞也可以减少产生效果的时间。细胞被解冻并像其他试剂一样使用,而不是在使用前培养和传代多次,消除了细胞培养的不一致性,加快了研究过程——将需要培养细胞的实验时间从1-2周缩短到24小时。

细胞的使用减少了细胞培养活动所需的资源和实验室空间。不仅成本降低了,而且更少的人需要进入小的细胞培养空间,使实验室中的物理距离更容易一些。

在培养的细胞减少变异

你可能无法使用解冻和使用的细胞的一切,但你仍然可以减少变异的细胞培养,尤其当你锁定后恢复您的研究活动。这里有几个技巧(1,3):

  • 始终从可信的来源获取单元
  • 执行污染的常规检测
  • 保持一致的培养条件
  • 控制细胞数量的变化
  • 请小心处理单元时
  • 验证细胞系身份的试验
  • 从稳定可靠的厂家获得培养基
  • 注意所有血清补充剂的批次和来源

参考文献

  1. 李。j . (2018)如何降低细胞培养变异亚搏足彩3月23日。
  2. TerWee,J.A.(2011)增加了直接使用低温保存的生物测定常规效力检测的一致性和效率(ready-to-plate)细胞j . Immunol方法370: 65 - 74。
  3. Arduengo, m (2012)成功的细胞分析的考虑II:细胞培养条件亚搏足彩1月11日。

了解更多有关细胞试剂的人气?特里利斯博士,从Promega公司将在试验指导研讨会上展示“处理细胞的试剂来设计重现的测定”的高通量筛选和铅发现在周三11月18日详细了解车间和[RË要点出席会议。


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米歇尔Arduengo

社交媒体经理Promega公司
米歇尔赢得了她的学士学位在生物学中的卫斯理学院梅肯,GA,她通过BCDB计划在博士埃默里大学在亚特兰大,佐治亚州。Michele是Promega的社交媒体经理,也是Promega Connections博客的执行编辑。亚搏足彩yabovipcom她喜欢沉浸在一本好书中,吹小号,织毛衣,穿雪鞋。

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